第358章 將軍與公主（番外）(2/5)

    

    異質雜種：胞質雜種的一種。指雜種的細胞核來源於一方，而細胞質來自於另一方

    

    體細胞雜種的篩選和鑒定方法有哪些，哪一種最有效

    

    （1）形態學鑒定：雜種在形態上往往介於雙親之間，包括株型、葉形、花器官等

    

    （2）細胞學鑒定

    

    染色體觀察：染色體數目是雙親之和，或少1至幾條染色體；細胞融合可以創造非整

    

    倍體、代換係、染色體片段置換係等材料

    

    流式細胞儀倍性分析：利用細胞倍性檢測儀可以粗略地分析雜種細胞的倍性，一般與

    

    雙親對照分析，測出的雜種的DNA含量基本是雙親之和。

    

    （3）分子標記鑒定：最有效的檢測手段，能檢測出遺傳物質的細重組

    

    （4）熒光原位雜交（FISH）鑒定：鑒定異源染色體的重組情況，將重組片段定位在染色體上。

    

    （5）蛋白質電泳分析：從基因表達產物判斷真假雜種，一般應有雙親作對照，可以對多種蛋白作分析

    

    最有效的是：分子標記鑒定

    

    II類(型)限製性核酸內切酶有何特點？

    

    （1）能夠識別特異性的DNA識別位點，這種識別位點通常是具有雙鏈回文對稱的結構。

    

    （2）切割後形成的雙鏈DNA分子能夠彼此互補並能夠重新連接。

    

    （3）切割和修飾功能由2種不同的酶催化所完成。

    

    （4）不需要ATP和SAM（S-腺苷甲硫氨酸）作為活性輔助因子。

    

    2、比較質粒載體、λ噬菌體載體和粘粒（Cosmid）載體的特點。

    

    質粒載體：（1）自主複製（2）質粒DNA的結合性

    

    λ噬菌體載體：（1）λ噬菌體載體是一種可在體外包裝的細菌病毒，可高效感染大腸杆菌（2）基因組為長度約為50kb的雙鏈DNA分子（3）基因組DNA呈線性，其兩賭5’末端帶有12個堿基的互補單鏈（粘性末端，cos位點）（4）溶源狀態：整合到大腸杆菌染色體，隨之複製（5）溶菌狀態：進入宿主細胞後，其兩端互補單鏈通過堿基配對形成環狀DNA分子，並隨宿主細胞複製，經過40～45min的生長循環，釋放出約100個感染性噬菌體顆粒，裂解大腸杆菌完成自我包裝。

    

    粘粒載體：（1）具有λ噬菌體的特性（cos位點）：被包裝後能高效轉化E.coli（2）具有質粒載體的特性：自主複製，帶有抗性標記，易於選擇陽性克隆（3）高容量的克隆能力：可載高達45kb外源DNA（4）因不含δ基因，故不會裂解（5）便於定向克隆

    

    何為人工染色體載體？

    

    人工構建的含有然染色體基本功能單位的載體體係。

    

    酵母人工染色體（YAC)

    

    ①存在高比例的嵌合體，即一個YAC克隆含有兩個本來不相連的獨立片段；

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